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dna亲子鉴定原理-法医DNA技术原理2417

作者:亲子鉴定师 发布时间:2022-01-26 07:32:01点击:54

dna亲子鉴定原理-法医DNA技术原理2417

1、 DNA亲子鉴定原理:法医DNA技术原理
不管法医学时不时,现有的DNA检测技术是其基本方法,所以方法都是一样的。
1、分子杂交技术,(包括Southern杂交、Northern杂交、基因芯片等)
分子杂交分析的基本原理是基于DNA探针检测硝化纤维素膜上变性固定的宿主细胞DNA。这些探针可以独立于宿主细胞 DNA 制备,例如,使用随机引物来制备探针。探针用酶、生物素、放射性同位素、地高辛(Dig)等标记,地高辛标记的核酸探针操作简单,灵敏度高。标记的探针可在 4°C 下保存长达两年,并且随时易于使用。因此,经常使用地高辛标记的核酸探针并进行光标记。方法是将光敏Dig标记在探针上制成光敏Dig-核酸探针,然后将靶DNA分子与固定在硝酸膜上的靶核酸杂交,与抗Dig-碱性磷酸酶结合,最终可以使用不同的检测方法进行检测,发光检测和颜色检测,灵敏度可以达到以下
2、基于DNA结合蛋白的方法
Threshold®免疫分析系统基于两种 DNA 序列非特异性蛋白,单链 DNA (ssDNA) 结合蛋白 (SSB) 和针对 ssDNA 的单克隆抗体。检测的基本过程是当生物素-DNA单链结合蛋白和脲酶-抗ssDNA单克隆抗体与变性的宿主细胞DNA结合,最终形成复合物,通过亲和素与生物素-硝化纤维素连接后,将所有非特定的膜,它们被洗脱出来,最后与尿素溶液一起放入读数器中。尿素酶催化尿素分解为NH3和CO2、从而引起pH值发生变化。阅读器根据 pH 值的变化将 pH 值转换为 DNA。以达到检测残留DNA含量的目的。
3、PCR法、实时定量PCR法
荧光定量PCR是在PCR扩增的基础上,加入特异性荧光探针的同时加入一对引物,产物的增加可以通过荧光信号来指示, 通过实时监测 PCR 系统中的荧光信号,对样品中的初始模板进行定量分析。定量PCR可以实时检测产物的量,通过加入已知浓度的标准样品绘制标准曲线,然后根据待测样品在标准曲线中的位置计算初始模板的浓度,所以以达到检测残留DNA含量的目的。